近日，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實驗室（簡稱嶺南實驗室）黃耀偉教授課題組，與浙江大學(xué)等單位合作，在肝病學(xué)領(lǐng)域頂級期刊Journal of Hepatology（影響因子30.1）上在線發(fā)表題為Targeting proteostasis of the HEV replicase to combat infection in preclinical models的研究工作（論文鏈接：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0168827822034626），報道了靶向宿主-病毒互作抗戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus，HEV）的新策略，解析了以HEV復(fù)制酶ORF1蛋白穩(wěn)態(tài)為藥物靶點的作用機制，并在課題組之前建立的HEV沙鼠感染模型中（Xu et al., Microbiology Spectrum, 2022）開展了系列藥物的臨床前試驗，為人類及動物戊型肝炎的治療提出了潛在的新療法和分子靶標(biāo)。

　　戊型肝炎病毒是一種全球流行的導(dǎo)致急性或慢性肝炎的人獸共患病原體，在世界范圍內(nèi)每年導(dǎo)致約2000萬例感染、300萬戊型肝炎臨床病例以及6萬人死亡，對孕婦和免疫功能低下的群體尤為危險。HEV在多種畜禽和野生動物中存在，尤其在豬群中感染率較高，已報道可以從豬、老鼠、兔子、鹿及駱駝等動物跨種傳播至人類，因此也具有重要的獸醫(yī)公共衛(wèi)生意義。然而，目前尚未開發(fā)出治療HEV感染的特異性療法，臨床上通常使用廣譜抗病毒藥物利巴韋林或干擾素a進行對癥治療。但是利巴韋林治療效果有限，并且具有嚴(yán)重的胎兒致畸性，干擾素a療法具有較強的副作用，亟需開發(fā)安全有效的HEV治療藥物。

　　由于缺乏高效的HEV細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和小鼠感染模型，HEV致病機制的研究和抗病毒藥物研發(fā)嚴(yán)重滯后。自2015年開始，課題組陸續(xù)建立了可以穩(wěn)定地表達HEV基因組、亞基因組RNA及GFP的基因3型 HEV復(fù)制子細(xì)胞系 ；同時還探究及優(yōu)化了HEV腹腔注射沙鼠感染模型。在此基礎(chǔ)上，課題組和合作團隊利用HEV復(fù)制子細(xì)胞系對1000多種小分子化合物庫進行高通量篩選，發(fā)現(xiàn)多種熱休克蛋白90的抑制劑（iHSP90）均能高效地抑制HEV復(fù)制。后續(xù)數(shù)年的分子機制深入研究揭示HEV通過劫持宿主蛋白HSP90以維持其核心復(fù)制酶（replicase/ORF1）的蛋白穩(wěn)態(tài)，這對病毒RNA的復(fù)制至關(guān)重要，并構(gòu)成HEV獨特的宿主-病原相互作用。使用HSP90的抑制劑靶向病毒ORF1-HSP90的相互作用導(dǎo)致ORF1與HSP90解離，促進ORF1發(fā)生K48型泛素化，從而介導(dǎo)ORF1的泛素蛋白酶體途徑降解。同時，在HEV沙鼠感染模型的臨床前研究發(fā)現(xiàn)，一種在體內(nèi)靶向HSP90治療腫瘤的二期臨床試驗藥物能安全有效地抑制或清除基因3型或4型HEV的感染，其療效顯著優(yōu)于廣譜抗病毒藥物利巴韋林，并且有效地緩解HEV感染造成的肝臟損傷。

　　因此，該研究工作通過高通量篩選發(fā)現(xiàn)了新型抗HEV藥物（iHSP90），解析了其通過靶向解離病毒復(fù)制酶與分子伴侶復(fù)合物而顯著降低病毒復(fù)制與感染的作用機制，在嚙齒類動物HEV感染模型中開展的臨床前實驗表明藥物能夠安全有效地治療HEV引起的肝損傷。這些發(fā)現(xiàn)揭示了HEV-宿主相互作用中正調(diào)控HEV復(fù)制的一種關(guān)鍵機制，并提出了一個臨床治療戊型肝炎疾病的新策略與候選藥物，加深了對這種人獸共患病毒感染生命周期的理解。

　　該論文以華南農(nóng)業(yè)大學(xué)及嶺南實驗室黃耀偉教授為主要通訊作者，浙江大學(xué)生命科學(xué)研究院徐平龍教授和醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院梁廷波教授為共同通訊作者。黃耀偉課題組的相關(guān)研究得到廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究重大項目（2020B0301030007）及嶺南實驗室科研項目（NG2022001）資助。

文圖/獸醫(yī)學(xué)院